【陜西宇鑫潔凈工程有限公司】分享:淺談無菌室潔凈度檢測與滅菌方式
【陜西宇鑫潔凈工程有限公司】無菌室在消毒處理后,無菌試驗(yàn)前及操作過程中需檢查空氣中菌落數(shù),以此來判斷無菌室是否達(dá)到規(guī)定的潔凈度,常用沉降菌法。一般無菌室的空間潔凈度要求達(dá)到10000級,萬級潔凈度對空間菌落的要求是:靜態(tài)檢測,自然沉降菌CFU/皿;操作區(qū)域如超凈工作臺、生物安全柜里需要達(dá)到潔凈度100級,百級潔凈度對空間菌落的要求是:靜態(tài)檢測,自然沉降菌CFU/皿。
一、沉降菌檢測方法
以無菌方式將3個營養(yǎng)瓊脂平板帶入無菌操作室,在操作區(qū)臺面左、中、右各放1個;打開平板蓋,在空氣中暴露30min后將平板蓋好,置36℃士1℃培養(yǎng)48h,取出計數(shù)。
二、無菌室的滅菌方式
1、紫外線照射
紫外線滅菌是利用適當(dāng)波長的紫外線破壞微生物機(jī)體細(xì)胞中的DNA或RNA結(jié)構(gòu),造成生長性細(xì)胞死亡來達(dá)到滅菌效果,屬于一種物理方式的滅菌。該方法可以殺滅各種微生物,包括細(xì)菌、病毒、真菌、立克次體及支原體等,是實(shí)驗(yàn)室中常用的滅菌方式。根據(jù)2002年國家衛(wèi)生部發(fā)布的《消毒技術(shù)規(guī)范》,紫外燈的要求是紫外強(qiáng)度不得低于70uW/c㎡(紫外燈1m處),空間內(nèi)的紫外燈布局要求每㎡不少于1.5W。并做到定期(至少每年1次)更換新的紫外燈管,以確保紫外燈管滅菌持續(xù)有效。
2、臭氧滅菌
臭氧是一種強(qiáng)氧化劑,通過氧化分解細(xì)菌內(nèi)部葡萄糖所需的酶,使細(xì)菌滅活死亡。使用臭氧滅菌,可殺滅細(xì)菌繁殖體和芽孢、病毒、真菌等,并可破壞肉毒桿菌病毒。另外,臭氧對霉菌有強(qiáng)的殺滅作用。用臭氧消毒空氣,須是在封閉空間,且室內(nèi)無人條件下進(jìn)行,消毒后至少30min才能進(jìn)入。一般滅菌時間選擇30min即可,要求空間中臭氧濃度不低于20mg/m3。
3、化學(xué)熏蒸
采用易揮發(fā)氣化的化學(xué)物質(zhì)的蒸汽,對空間微生物進(jìn)行殺滅的目的,常用甲醛、過氧化氫、過氧乙酸等。這種方法明顯的缺點(diǎn)是易殘留,對人體傷害大。每次熏蒸后,至少需要通風(fēng)24h才可以使用。所以只有在其他滅菌方法無法達(dá)到理想的滅菌效果時,才會考慮這種方法。
無菌室作為微生物檢測的空間,每一個質(zhì)檢員都要了解它的狀態(tài),才能保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確度。
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