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【陜西宇鑫潔凈工程有限公司】分享:淺談無(wú)菌室潔凈度檢測(cè)與滅菌方式

2023-02-17

【陜西宇鑫潔凈工程有限公司】無(wú)菌室在消毒處理后,無(wú)菌試驗(yàn)前及操作過(guò)程中需檢查空氣中菌落數(shù),以此來(lái)判斷無(wú)菌室是否達(dá)到規(guī)定的潔凈度,常用沉降菌法。一般無(wú)菌室的空間潔凈度要求達(dá)到10000級(jí),萬(wàn)級(jí)潔凈度對(duì)空間菌落的要求是:靜態(tài)檢測(cè),自然沉降菌CFU/皿;操作區(qū)域如超凈工作臺(tái)、生物安全柜里需要達(dá)到潔凈度100級(jí),百級(jí)潔凈度對(duì)空間菌落的要求是:靜態(tài)檢測(cè),自然沉降菌CFU/皿。
一、沉降菌檢測(cè)方法
以無(wú)菌方式將3個(gè)營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板帶入無(wú)菌操作室,在操作區(qū)臺(tái)面左、中、右各放1個(gè);打開平板蓋,在空氣中暴露30min后將平板蓋好,置36℃士1℃培養(yǎng)48h,取出計(jì)數(shù)。
二、無(wú)菌室的滅菌方式

1、紫外線照射

紫外線滅菌是利用適當(dāng)波長(zhǎng)的紫外線破壞微生物機(jī)體細(xì)胞中的DNA或RNA結(jié)構(gòu),造成生長(zhǎng)性細(xì)胞死亡來(lái)達(dá)到滅菌效果,屬于一種物理方式的滅菌。該方法可以殺滅各種微生物,包括細(xì)菌、病毒、真菌、立克次體及支原體等,是實(shí)驗(yàn)室中常用的滅菌方式。根據(jù)2002年國(guó)家衛(wèi)生部發(fā)布的《消毒技術(shù)規(guī)范》,紫外燈的要求是紫外強(qiáng)度不得低于70uW/c㎡(紫外燈1m處),空間內(nèi)的紫外燈布局要求每㎡不少于1.5W。并做到定期(至少每年1次)更換新的紫外燈管,以確保紫外燈管滅菌持續(xù)有效。

2、臭氧滅菌

臭氧是一種強(qiáng)氧化劑,通過(guò)氧化分解細(xì)菌內(nèi)部葡萄糖所需的酶,使細(xì)菌滅活死亡。使用臭氧滅菌,可殺滅細(xì)菌繁殖體和芽孢、病毒、真菌等,并可破壞肉毒桿菌病毒。另外,臭氧對(duì)霉菌有強(qiáng)的殺滅作用。用臭氧消毒空氣,須是在封閉空間,且室內(nèi)無(wú)人條件下進(jìn)行,消毒后至少30min才能進(jìn)入。一般滅菌時(shí)間選擇30min即可,要求空間中臭氧濃度不低于20mg/m3。
3、化學(xué)熏蒸
采用易揮發(fā)氣化的化學(xué)物質(zhì)的蒸汽,對(duì)空間微生物進(jìn)行殺滅的目的,常用甲醛、過(guò)氧化氫、過(guò)氧乙酸等。這種方法明顯的缺點(diǎn)是易殘留,對(duì)人體傷害大。每次熏蒸后,至少需要通風(fēng)24h才可以使用。所以只有在其他滅菌方法無(wú)法達(dá)到理想的滅菌效果時(shí),才會(huì)考慮這種方法。
無(wú)菌室作為微生物檢測(cè)的空間,每一個(gè)質(zhì)檢員都要了解它的狀態(tài),才能保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確度。

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